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大腸桿菌O157計數培養基(膜過濾法)

更新時間:2020-02-19  |  點擊率:1089

大腸桿菌O157計數培養基(膜過濾法)

貨號

名稱

價格

存儲

M1862

Hicrome™ M- Modified EC0157:H7 Selective Agar Base

100G,500G

2-8°C密封

FD295

HiCrome ECO157: H7 Selective Supplement, Modified

2VL,2X5VL

2-8°C

 

用途                                  

推薦用于薄膜過濾法初步計數食品中大腸桿菌O157:H7

 

原理

該培養基推薦用于從肉、禽、奶、嬰兒配方乳等食品中分離大腸桿菌O157:H7(1,2)。它基于三種生化反應(酶)進行鑒別——葡萄糖醛酸酶、山梨醇發酵和賴氨酸脫羧酶(4),大腸桿菌O157為(-)(-)(+)。

 

培養基中的細菌會先發酵葡萄糖。葡萄糖耗竭后發酵山梨醇,導致pH值下降(酚紅為指示劑),使菌落呈黃色。培養基還含有β葡萄糖醛酸酶的顯色底物,使菌落為藍色。對于山梨醇發酵(+)菌或賴氨酸(-)菌,其菌落中的藍色和黃色疊加為綠色。培養基中有賴氨酸,使賴氨酸脫羧酶陽性菌代謝后使pH值升高,產生粉色菌落。抑制劑中的莫能菌素抑制革蘭陽性菌,在44-44.5℃孵育可抑制革蘭陰性菌,

 

該培養基也用于食品中的大腸桿菌計數(3)。

 

培養基成分

組成                         克/升

動物組織酶解物         5.000

酵母粉                      3.000

氯化鈉                      5.000

賴氨酸                      10.000

山梨醇                      20.000

葡萄糖                      2.500

硫酸鎂                      1.500

脫氧膽酸鈉               0.150

葡萄糖醛酸鈉            0.500

酚紅                         0.120

顯色混合劑               0.050

瓊脂                        15.000

 pH (25°C) 7.2±0.2

 

配制                                         

62.82g重懸于1000ml蒸餾水,加熱至沸騰使*溶解。請勿高壓滅菌。冷卻至45-50°C,無菌加入1管添加劑(FD295),混勻并傾注平板。

 

培養結果                  

加入添加劑(貨號FD295)后,44 -44.5°C培養18-24小時,結果如下:

 

大腸桿菌——綠色

大腸桿菌O157:H7——粉色

肺炎克雷伯菌——黃色

脫氧膽酸鈉和添加劑增加選擇性——革蘭氏陽性菌被抑制

 

參考文獻

1.Entis, P.,and I. Lerner.1997. 24-hour presumptive enumeration of Escherichia coli o157:H7 in food using the ISO-GRID method with SD-39 agar.J.Food Prot. 60:883-890.

 

2.Entis, P.1998. Direct 24-hour presumptive enumeration of Escherichia coli o157:H7 in food using the hydrophobic grid membrane filter,followed by serological confirmation : collaborative study.J.AOAC Int. 81:403-418.

 

3.Entis, P., and I.Lerner. 1998. Enumeration of #-glucuronidase positive E.coli in foods by using the ISO-GRID method with SD-39 agar.J.Food Prot. 61:913-916.

 

4.Corry J.E.L, Curtis G.D.W., Baird R.M., Culture Media for Food Microbiology, Progress in Industrial Microbiology, Volume 37.

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